檢查高壓滅菌器空氣是否排凈的方法：

在排氣管的出口處接一皮管，將另一端插入冷水盆中，若管內排出的氣體在冷水中產生氣泡，則表示尚未排凈。仍需繼續排氣；若不產生氣泡，則表示鍋內的冷空氣已基本排凈。

如果待高壓滅菌器內有一定量的蒸汽之后再排氣，則有利于空氣的排凈。

在排氣過程中，有時排氣管道可被異物阻塞，此時可觀察排氣管道上的溫度計指示溫度與按磅表壓力值推算的溫度是夠接近。由壓力磅數換算溫度的簡易公式是：

溫度（℃）=磅表指示壓力磅數+106

例如：磅表指示壓力為15磅，則在純蒸汽的情況下，鍋內溫度應為15+106=121℃。若溫度計指示溫度低于121℃，則說明鍋內空氣未排凈，可能有異物阻塞排氣管道，應予以排除。

高壓滅菌器注意:*排除鍋內空氣，使鍋內全部是水蒸氣，滅菌才能*。高壓滅菌器放氣有幾種不同的做法，但目的都是要排凈空氣，使鍋內均勻升溫，保證滅菌*。常用方法是：關閉放氣閥，通電后，待壓力上升到0.05MPa時，打開放氣閥，放出空氣，待壓力表指針歸零后，再關閉放氣閥。關閥再通電后，壓力表上升達到0.1MPa時,開始計時，維持壓力0.1～0.15MPa 20分鐘。

到達保壓時間后，即可切斷電源，在壓力降到0.5MPa，可緩慢放出蒸氣，應注意不要使壓力降低太快，以致引起激烈的減壓沸騰，使容器中的液體四溢。當壓力降到零后，才能開蓋，取出培養基，擺在平臺上，以待冷凝。不可久不放氣，引起培養基成分變化，以至培養基無法擺斜面。一旦放置過久，由于鍋爐內有負壓，蓋子打不開，只要將放氣閥打開，大氣壓入，內外壓力平衡，蓋子便易打開了。

對高壓滅菌器后不變質的物品，如無菌水、栽培介質、接種用具，可以延長滅菌時間或提高壓力。而培養基要嚴格遵守保壓時間，既要保壓*，又要防止培養基中的成分變質或效力降低，不能隨意延長時間。